Biolística
A Biolística, também chamado de biobalística, é um método de transferência direta de genes em uma célula, com o objetivo de criação de organismos transgênicos. É o método de transferência direta mais usado para transformar células vegetais. [1][2]Consiste na propulsão dos genes de interesse no interior das células com a ajuda de um canhão de DNA, com o qual se modifica o DNA da célula.[3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10].O termo biolística deriva de um trocadilho com a palavra de balística.
Princípios[editar | editar código-fonte]
Utilizam-se microesferas de metal cobertas de DNA (bolas de ouro ou tungstênio de um micrón de diámetro). Projetam-se a enorme velocidade sobre as células que devem modificar com o fim de cruzar sua parede. Estas bolas atrasar-se-ão progressivamente cruzando as diferentes capas celulares. Algumas das células atingidas vão então a integrar espontaneamente os genes em seu genoma. Mas o núcleo da célula inclui o DNA de maneira aleatória.
Segundo as espécies, o período que tem de decorrer dantes de obter uma raça transgênica estável pode variar de alguns dias a vários meses. Este método utiliza-se também para efetuar a transformação dos genomas de orgánulos, cloroplastos ou mitocondrias. A transformação por biolística é uma alternativa interessante à transformação das plantas por Agrobacterium tumefaciens, já que não requer sequências exógenas para permitir a integração do fragmento de DNA.
O projeto[editar | editar código-fonte]
O sistema de biolística era originalmente uma pistola de ar comprimido Crosman modificada para disparar partículas densas de tungstênio. Ela foi inventada por John C Sanford, Ed Wolf e Nelson Allen na Universidade Cornell,[11][12][13] e Ted Klein da DuPont, entre 1983 e 1986.
Referências
- ↑ Caron-Laramée, Amélie (2016). «Modèle analytique de pénétration de particules dans la peau par injection biolistique». Consultado em 16 de maio de 2021
- ↑ André Gallais, Agnès Ricroch;. «Plantes transgéniques, faits et enjeux, éditions Quae 2006». ISBN 2-7592-0001-9. Consultado em 15 de julho de 2010
- ↑ OGM Description - Méthodes d'obtention - Domaines d'application, Francine Casse et Jean-Christophe Breitler, Ed France Agricole, 2001
- ↑ Sanford, J. C., T. M. Klein, et al. (1987). "Delivery of substances into cells and tissues using a particle bombardment process." Journal of Particulate Science and Technology 5: 27-37
- ↑ Klein, T. M., E. D. Wolf, et al. (1987). "High-velocity microprojectiles for delivering nucleic-acids into living cells." Nature 327(6117): 70-73.
- ↑ Ishida, Y., Y. Hiei, et al. (2007). "Agrobacterium-mediated transformation of maize." Nature Protocols 2(7): 1614-1621.
- ↑ Ishida, Y., H. Saito, et al. (1996). "High efficiency transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens." Nature Biotechnology 14(6): 745-750.
- ↑ Tingay, S., D. McElroy, et al. (1997). "Agrobacterium tumefaciens-mediated barley transformation." Plant Journal 11(6): 1369-1376.
- ↑ Frame, B. R., H. Y. Zhang, et al. (2000). "Production of transgenic maize from bombarded type II callus: Effect of gold particle size and callus morphology on transformation efficiency." In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant 36(1): 21-29.
- ↑ Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Multicolor DiOlistic Labeling of the Nervous System Using Lipophilic Dye Combinations Neuron Volume 27, Issue 2, 219-225
- ↑ Segelken, Roger (14 de maio 1987). «Biologist invent gun for shooting cells with DNA» (PDF). Cornell Chronicle. p. 3. Consultado em 24 de abril de 2016
- ↑ Sanford, J.C.; Klein, T,.M.; Wolf, E.D.; Allen, N (1987). «Delivery of substances into cells and tissues using a particle bombardment process». Particulate Science and Technology. 5 (1): 27-37. doi:10.1080/02726358708904533
- ↑ Klein, T.M.; Wolf, E.D.; Wu, R.; Sanford, J.C. (Maio de 1987). «High-velocity microprojectiles for delivering nucleic acids into living cells». Nature. 327: 70-73. doi:10.1038/327070a0